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　　    中藥分離方法和有效成分提取分離研究
　　中藥研究的水平及中藥質量的保障在很大程度上依賴于中藥有效成分提取分離的結果。與傳統(tǒng)中藥有效成分提取分離方法相比，新型分離技術具有明顯的優(yōu)越性。運用此類高新技術研究現(xiàn)代中藥，是中藥現(xiàn)代化的重要途徑，必將為中藥現(xiàn)代化研究注入新的活力。
　　槐花米
　　槐花米簡稱槐米，所含主要成分為蘆丁，又稱為蕓香苷，即槲皮素3-O-蕓香糖苷，槲皮素為5，7，3′，4′-四OH黃酮。
　　蘆丁溶解度在冷水中1:10000，沸水中1:200，沸乙醇中1:60，沸甲醇中1:7，可溶于乙醇、吡啶、甲酰胺、甘油、丙酮、冰乙酸、乙酸乙酯中，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚。
　　蘆丁分子中具有較多酚羥基，顯弱酸性，易溶于堿液中，酸化后又析出，因此可以用堿溶酸沉的方法提取蘆丁。
　　蘆丁分子中因含有鄰二酚羥基，性質不太穩(wěn)定；暴露在空氣中能緩緩氧化變?yōu)榘岛稚�，在堿性條件下更容易被氧化分解。硼酸鹽能與鄰二酚羥基結合，達到保護的目的，故在堿性溶液中加熱提取蘆丁時，往往加入少量硼砂。有7-OH、4′-OH，酸性強，可用于提取。蘆丁可溶于沸水（1：200），微溶于冷水（1：10000）此性質可用于提取與精制。
　　蘆丁的提取方法，此法簡稱堿提酸沉法，可用于生產(chǎn)。需注意的是堿提時，堿性一定不可太強（pH8～9），如pH太高，則結構有可能降解，而使收率降低，甚至結構完全破壞。
　　蘆丁的另一種提取方法是沸水提取法，即取槐米粗粉加10倍熱水煮沸20～30分鐘，過濾，再加水煮1～2次，合并幾次煮提液，冷卻放置數(shù)小時后即可析出蘆丁粗品，過濾，用水重結晶一次，可得水精制品蘆丁，再用甲醇重結晶一次，可得純度更高的蘆丁。
　　超臨界流體萃取技術
　　超臨界流體萃取是一種以超臨界流體代替常規(guī)有機溶劑對目標組分進行萃取和分離的新型技術。與傳統(tǒng)的提取分離法相比，超臨界流體萃取技術較大的優(yōu)點是可以在近常溫條件下提取分離不同極性、不同沸點的化合物，幾乎保留中藥中全部有效成分，無有機溶劑殘留，因此，其中藥有效成分提取的純度高，而且收率高，操作簡單、節(jié)能。有研究發(fā)現(xiàn)，用超臨界流體萃取技術提取川芎中的阿魏酸含量可達0.04％，而溶媒法提取阿魏酸含量僅為0.02％。說明超臨界流體萃取技術在中藥提取分離中的應用前景廣闊，特別是對一些資源少、療效好、劑量小、附加值高的中藥極為適用。
　　大孔樹脂吸附法
　　大孔樹脂吸附分離技術是以采用特殊的吸附劑從中藥復方煎液中有選擇地吸附其中的有效成分，除去無效成分的一種提取精制的新工藝。此外，大孔吸附樹脂還可應用于中藥有效成分樣品組成含量測定前的預分離。該方法具有設備簡單、操作方便、節(jié)省能源、成本低、產(chǎn)品純度高、不吸潮等優(yōu)點，因此大孔樹脂吸附法在中藥研究和生產(chǎn)中的應用日益廣泛。將這種方法應用于中藥有效成分的分離取得了相當顯著的成果。近年來，大孔吸附樹脂法已廣泛地應用于中藥有效成分
　　的分離與精制。有報道研究發(fā)現(xiàn)，用6種大孔樹脂吸附法分離竹葉黃酮，其中AB－8樹脂較宜于竹葉黃酮的提純，經(jīng)AB－8樹脂吸附分離后，提取物中黃酮含量提高1倍以上。采用大孔樹脂法精制腦康口服液，結果經(jīng)大孔樹脂法精制的腦康口服液澄明度明顯提高。目前，該技術已在國內(nèi)廣泛用于純化苷類、黃酮類、生物堿類成分。隨著有關基礎研究的進一步深入，以及相關標準、法規(guī)的進一步完善，大孔樹脂精制純化技術必將成為推動中藥現(xiàn)代化的重要手段。
　　半仿生提取法
　　半仿生提取法(簡稱SBE)是近幾年提出的新方法。它是從生物藥劑學的角度，將整體藥物研究法與分子藥物研究法相結合，模擬口服藥物經(jīng)胃腸道轉運吸收的環(huán)境，采用活性指導下的導向分離方法；是經(jīng)消化道口服給藥的制劑設計的一種新的提取工藝。
　　半仿生提取法的主要特點，一是提取過程符合中醫(yī)配伍和臨床用藥的特點和口服藥物在胃腸道轉運吸收的特點。二是在具體工藝選擇上，既考慮活性混合成分又以單體成分作指標，這樣不僅能充分發(fā)揮混合物的綜合作用，又能利用單體成分控制中藥制劑的質量。三是有效成分損失少。在對多個單味中藥和復方制劑的研究中，半仿生提取法已經(jīng)顯示出較大的優(yōu)勢和廣泛的應用前景。有研究以阿魏酸、苦參堿、苦參總堿及干浸膏為指標，采用SBE和水提取法（WE法）對當歸苦參丸的提取工藝進行比較研究，經(jīng)4個指標綜合評價發(fā)現(xiàn)，SBE法優(yōu)于WE法。但目前半仿生提取法仍沿襲高溫煎煮方式，容易影響許多有效活性成分，降低藥效。因此，有學者建議將提取溫度改為近人體溫度，在提取液中加入擬人體消化酶活性物質，使提取過程更接近于藥物在人體胃腸道的轉運吸收過程，更符合辨證施治的中醫(yī)藥理論。
　　酶工程技術
　　酶工程技術是近幾年來用于重要工業(yè)的一項生物工程技術。傳統(tǒng)的提取方法如煎煮、有機溶劑浸出醇處理方法等，提取時溫度高、提取率低、浪費乙醇、成本高、不安全，而選用適當?shù)拿�，可以通過酶反應溫和地將植物組織分解，加速有效成分的釋放提取。選用相應的酶可將影響液體制劑澄清度的雜質如淀粉、蛋白質、果膠等分解祛除，也可促進某些極性低的脂溶成分轉化成糖苷類易溶于水的成分而有利于提取。酶法在藥物提取中有較大的應用潛力，但該技術也存在一定的局限性。酶提取法對實驗條件要求比較高，為使酶發(fā)揮較大作用，需先通過實驗確定，掌握較適合的溫度、pH值及作用時間等。
　　超微粉碎技術
　　超微粉碎是近年來迅速發(fā)展起來的高新技術，能把原材料加工成微米甚至納米級的微粉。尤適用于纖維多的植物類中藥材的粉碎，從而提高藥物吸收率、生物利用度，增強靶向性。超微粉碎主要應用于一些貴重藥材及稀有藥材的粉碎，如人參、珍珠、三七、天麻、全蝎、羚羊角等。但應針對具體品種，確定其較適粒度，才能更好地發(fā)揮超微粉碎的作用。有些藥材則不適合用超微粉碎，如含淀粉、黏液質較多的藥材，這些無效成分會因超微粉碎大量暴露而被釋放出來，影響有效成分的釋放與吸收。
　　高速離心分離技術
　　離心分離是通過離心機的高速運轉，使離心加速度超過重力加速度的成百上千倍，而使沉降速度增加，以加速藥液中雜質沉淀并除去的一種方法。結合運用多級過濾法，注射劑生產(chǎn)中的預濾，可以大大提高濾速和效果，省時省力，且能提高注射劑的澄清度。高速離心作為一種物理分離技術，在其分離過程中能有效地防止中藥中有效成分的損失，較大限度地保存藥物的活性成分，且還可縮短工藝流程。
　　高速逆流色譜分離技術
　　高速逆流色譜分離技術是一種不用任何載體或支撐體的液-液分配色譜技術。該技術分離效率高，產(chǎn)品純度高，不存在載體對樣品的吸附和污染，具有制備量大和溶劑水泵少等優(yōu)點，可廣泛應用于生物工程、醫(yī)學、醫(yī)藥、化工、食品等領域。上世紀80年代后期，廣泛應用于天然藥物成分的分離制備和分析中。有報道用該技術研究生物堿、黃酮、蒽醌、香豆素等成分的分離都取得了較好的效果。高速逆流色譜分離法不僅適用于非極性化合物的分離，也適用于極性化合物的分離，還可以應用于進行中藥粗提物中各組分的分離或進一步的純化精制。該技術有望成為中藥有效成分質量標準研究、分析的一種新方法，也會成為中藥制劑生產(chǎn)的一種新型分離技術。
　　分子印跡分離技術
　　分子印跡分離技術，就是以待分離的化合物為印跡分子（也稱模板、底物），制備對該類分子有選擇性識別功能的高分子聚合物——分子印跡聚合物，然后以這種分子印跡聚合物(MIP)為固定相來進行色譜分離的技術。其較大的特點是分子識別性強，選擇性高，而且制得的MIP有高度的交聯(lián)性，固定相不易變形，有良好的機械性能和較長的使用壽命。分子印跡分離技術是一種高效的中藥有效成分分離技術。有研究顯示，與傳統(tǒng)的分離純化方法比較，采用環(huán)糊精分子印跡聚合物分離純化葛根素，可將葛根素一步分離純化到98％，收率達80％以上，而傳統(tǒng)的方法進行分離純化則需要6步，且收率僅為10％左右。
　　鉛鹽法
　　此法過去曾用于研究，目前已很少采用。一般是在乙醇或甲醇溶液中依次加入適量中性醋酸鉛、堿式醋酸鉛水液，分別使具有鄰二酚羥基成分（包括黃酮）及含羥基成分，具有一般酚羥基的成分分離，再分別將鉛鹽沉淀懸浮于醇中，脫鉛后得到成分。
　　硼酸鉻合法
　　有鄰二酚羥基的黃酮類化合物可與硼酸絡合，生成物易溶于水，借此可與無鄰二酚羥基的黃酮類化合物相互分離。
　　pH梯度萃取法
　　pH梯度萃取法適合于酸性強弱不同的游離的黃酮類化合物的分離，將混合物溶于有機溶劑（如乙醚）中，依次用5％NaHCO3（萃取出7，4′－二羥基黃酮）、5％Na2CO3（萃取出7－或4′－羥基黃酮）、0.2％NaOH（萃取出具一般酚羥基黃酮）、4％NaOH（萃取出5－羥基黃酮）萃取而使之分離。
　　此外，超聲提取技術、微波輔助萃取技術、分子精餾和短程精餾、中藥絮凝分離技術、雙水相萃取技術、液泛法、空氣爆破法等，都陸續(xù)在中藥有效成分提取分離技術中得到了應用�？梢灶A測，這些現(xiàn)代高新技術對于推動中藥現(xiàn)代化步伐將起到深遠的影響。